การเตรียมโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อ Vibrio harveyi สายพันธุ์ 1526

Abstract

การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีจำเพาะต่อ V. harveyi 1526 และไอโซเลตอื่นโดยการฉีดกระตุ้นภูมิคุ้มกันหนูขาวด้วย V. harveyi ในรูปคงสภาพ (heat-killed) และเสียสภาพ (SDS-treated) สามารถผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีได้จำนวน 15 โคลน ซึ่งสามารถแบ่งตามความจำเพาะต่อ V. harveyi และแบคทีเรียที่ใช้ในการทดสอบได้ทั้งหมด 10 กลุ่ม ซึ่งตรวจสอบด้วยวิธี dot blot พบว่าโมโนโคลนอลแอนติบอดี 5 กลุ่ม มีความจำเพาะต่อ V. harveyi โดยไม่แสดงปฏิกิริยาข้ามกับ Vibrio spp. โมโนโคลนอลแอนติบอดี 2 กลุ่ม มีความจำเพาะต่อ V. harveyi และแสดงปฏิกิริยาข้ามกับแบคทีเรียสกุลวิบริโอเท่านั้น และโมโนโคลนอลแอนติบอดี 3 กลุ่ม มีความจำเพาะต่อแบคทีเรียสกุลวิบริโอและแสดงปฏิกิริยาข้ามกับแบคทีเรียแกรมลบสกุลอื่นที่นำมาทดสอบ การตรวจสอบเพื่อติดตาม V. harveyi 1526 ในเนื้อเยื่อกุ้งขาว Litopenaeus vannamei โดยวิธี immunohistochemistry พบว่ามีโมโนโคลนอลแอนติบอดี 2 ชนิด (VH11-6E และ VH17-1B) เท่านั้นที่สามารถตรวจการติดเชื้อ V. harveyi 1526 ได้ โมโนโคลนอลแอนติบอดีแอนติบอดีที่ผลิตได้สามารถนำไปใช้จำแนก V. harveyi ออกจาก Vibrio spp. ต่าง ๆ และแบคทีเรียสกุลอื่นๆ และอาจสามารถนำไปใช้พัฒนาเป็นชุดตรวจอย่างง่ายเพื่อใช้ตรวจการติดเชื้อ V. harveyi ในอุตสาหกรรมสัตว์น้ำต่อไป